啤酒設備后期酵母培養

啤酒設備后期酵母培養

首先人員上的規定：各級擴培人員的無菌意識要高度一致，在實驗室階段，一定嚴格按照無菌操作規程進行；生產現場擴培人員上崗前要換好指定工作服，擴培操作前要用75%酒精擦拭雙手，避免發生交叉污染。

其次，對環境要求也非常嚴格：無種室應按要求定期消毒，紫外線照射至少30min，實驗儀器應隨時在0.1MPa之下消毒20-30min；接種和添加麥汁過程之中的所有管道和閥門必須用熱水或蒸汽完全消毒。室內地面和墻面也應定期噴灑一定濃度的消毒劑進行消毒滅菌。室內空氣在接種前應完全消毒，接種后應進行二次消毒。

然后是擴培麥汁的要求：種子罐之前的麥汁盡量取頭號麥汁，加水調節濃度為11～120P ，滅菌要求0.1MPa，20～30min；也可經過特殊處理后，進行干熱滅菌，要求120℃恒溫3h；現場擴培用麥汁為沉淀槽中的熱麥汁，濃度在120P左右，α-氨基氮應在180～220mg/L，可添加適量的酵母營養鹽。麥汁滅菌方法同前。

最后是壓縮空氣：用于通風和供氧的壓縮空氣，必須經過三級膜過濾后才能使用。同時，氧氣含量要適當，酵母在氧氣不足的情況下生長緩慢，而氧氣過多會造成酵母細胞呼吸酶活性過強，酵母繁殖過多不利于后期發酵。一般來說，在進入培養罐之前，膨脹的培養酵母應該每天充氣三次，每次20-30分鐘。

一、實驗目的：

    學習酵母菌種的擴大培養方法，為實驗室啤酒發酵準備菌種。

二、實驗原理：

    在進行啤酒發酵之前，必須準備好足夠量的發酵菌種。在啤酒發酵中，接種量一般應為麥芽汁量的10%（使發酵液中的酵母量達1×107個酵母/mL），因此，要進行大規模的發酵，首先必須進行酵母菌種的擴大培養。擴大培養的目的一方面是獲得足量的酵母，另一方面是使酵母由最適生長溫度（28℃）逐步適應為發酵溫度（10℃）。

三、實驗器材：

    恒溫培養箱，生化培養箱，顯微鏡等。

四、實驗步驟：

    本次實驗擬用60升麥芽汁，因此應制備6000 mL含1×108個酵母/mL的菌種，以每班10個組計算，每個組應制備約600 mL菌種。建議流程如下：                                                                                   

 菌種擴大:    麥汁斜面菌種→麥汁平板—28℃，2天→鏡檢，挑單菌落3個，接種 50mL麥汁試管（或三角瓶）—20℃，2天（ 每天搖動3次）→550mL麥汁三角瓶—15℃，2天（每天搖動3次）→計數備用。                

 1.  培養基的制備

取協定法制備的麥芽汁濾液（約400 mL），加水定容至約600 mL，取50 mL裝入250 mL三角瓶中，另550 mL至1000 mL三角瓶中，包上瓶口布后，0.05 Mpa滅菌30分鐘。

2.  菌種擴大培養

按上面流程進行菌種的擴大培養（斜面活化菌種由教師提供）。注意無菌操作。

五、注意事項：滅菌后的培養基會有不少沉淀，這不影響酵母菌的繁殖。若要減少沉淀，可在滅菌前將培養基充分煮沸并過濾。